股骨头坏死(ONFH)是由于多种原因导致的股骨头局部血运不良,进一步引起成骨细胞、骨髓造血细胞和脂肪细胞缺血、坏死,最终导致骨小梁断裂,股骨头塌陷髋关节功能障碍的一种病变。ONFH的发病机制尚不明确,缺乏切实有效的治疗方法,所以建立与人类临床病理特征相似的股骨头坏死动物模型对研究其发病机制及寻求有效的治疗方法尤为重要,而判定模型是否成功是至关重要的一步。
常见的模型评价指标:
1.影像学评价
X射线检查:
股骨头坏死模型的骨头松脆,易剖开凿切,X射线往往显示股骨头周围骨质变疏松,骨皮质变薄,骨小梁模糊不清或消失,股骨头内有散在低密度区的表现,但此项指标不适用于早期股骨头坏死的诊断,普通CT比X线早发现II期股骨头坏死,而Micro-CT能发现I期骨小梁变细、变薄甚至断裂,能检测骨小梁骨微结构的定量指标,但不能显示软组织及股骨头内骨髓、脂肪的变化。
国际骨循环学会(ARCO)对股骨头坏死进行分期:
0期和I期:ONFH动物行髋关节正位X线和普通CT结果无异常表现;
II期:股骨头X线斑片状阴影,硬化及囊肿形成,但股骨头无塌陷;
III期:骨性关节面的下方出现新月形透明带,即“新月征”;
IV期:股骨头塌陷,关节间隙变窄,囊性变等;
MRI检查:
磁共振成像(MRI)是断层成像的一种,它利用磁共振现象从人体中获得电磁信号,并重建出人体信息,从磁共振图像中我们可以得到物质的多种物理特性参数,如质子密度,自旋-晶格驰豫时间T1,自旋-自旋驰豫时间T2,扩散系数,磁化系数,化学位移等等。MRI可显示股骨头外形、关节间隙、关节积液、股骨头内信号均匀程度、骨髓是否水肿及骨坏死等信号。T1WI上表现为点状、细线状、片状低信号强度,T2WI上表现为点状、细线状、片状高信号强度。
2.病理学检查
病理学检查是验证造模成功的金标准,动物处死后取股骨头制作成病理切片,能观察到空缺骨陷窝数量增加,骨细胞中脂肪细胞堆积,细胞核被挤向边缘,骨髓造血组织减少,骨小梁稀疏、变细变薄,甚至断裂,骨细胞核固缩溶解、消失,成骨细胞消失,脂肪组织占据骨髓区。虽然组织病理学能检测出超早期股骨头坏死,但需要处死动物,不利于后续在体实验的进行。
3.血生化测定
股骨头坏死过程中的脂代谢的各项血脂指标,包括总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)、高密度脂蛋白(HDL)、血浆脂联素含量与正常组动物有显著性差异。此外,还可结合血清钙磷含量检测、血液流变学检测等指标进行骨坏死程度的判断。
4.骨生物力学
在股骨头坏死动物模型中,利用骨生物力学中股骨弯曲载荷值、单位面积最大载荷量、弹性模量的测定,可以显示出坏死动物股骨脆性明显增加,骨质明显疏松。骨中的Ca、P是骨矿物质的主要成分,股骨中Ca、P含量的高低是衡量骨质的一个非常重要标志,Ca、P含量低,说明骨质松脆。骨密度,是骨质量的一个重要标志,反映骨质疏松程度。骨内压与骨坏死的密切关系,在股骨头坏死的早期,骨内压就有明显的增高。因此骨生物力学、骨Ca、P、骨密度及骨内压可作为股骨头坏死动物模型建立成功的间接性评价指标。
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